痛風(fēng)是一種因嘌呤代謝紊亂及( 或) 尿酸排泄減少的晶 體相關(guān)性關(guān)節(jié)病，尿酸晶體沉積在關(guān)節(jié)內(nèi)和關(guān)節(jié)周圍的 空間，并激活先天免疫系統(tǒng)。降低尿酸鹽治療是治療本病 的基石，當(dāng)血清尿酸鹽明顯下降后，急性痛風(fēng)發(fā)作的風(fēng)險(xiǎn)明 顯降低。蠲痹歷節(jié)清方在急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的臨床治療 中發(fā)揮了一定的功效，但具體作用機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn) 通過采用高蛋白飲食的方法( 飲食中的蛋白含量為 50% ) 建 立雞痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，探討蠲痹歷節(jié)清方治療痛風(fēng)的作 用機(jī)制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1. 1 動(dòng)物

30 日齡 SPF 級(jí)健康雄性湘黃雞 48 只，體質(zhì)量 ( 500 ± 50) g，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心代購，合格證 號(hào): 2017 － 0004。本實(shí)驗(yàn)通過湖南中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1. 2 藥物及試劑

蠲痹歷節(jié)清方藥物組成: 蒼術(shù) 20g，黃芩 10g，黃柏 10g，防己 10g，土茯苓 15g，茵陳 15g，澤瀉 10g，白 術(shù) 10g，當(dāng)歸 15g，甘草 6g。生藥購自湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附 屬醫(yī)院，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院統(tǒng)一煎制、濃縮至含生藥 0. 83g /ml，4℃保存; 別嘌醇片( 廣東彼迪藥業(yè)有限公司，批 號(hào): H44021368) ，以蒸餾水配置成 1. 95mg /ml，4℃保存; 水合 氯醛( 天津科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào): 20140303) 。

1. 3 主要儀器

JY3002 型電子天平( 上海精密科學(xué)儀器有限公司) ; Shandon325 型石蠟切片機(jī)( Shandon 公司) ; LEICA DM LB2 型雙目顯微鏡( LEICA 公司) ; HHS － 2 電子恒溫不 銹鋼水浴鍋( 上海南陽儀器有限公司) ; MIAS 醫(yī)學(xué)圖像分析 系統(tǒng)( 北航公司) ; Haier 醫(yī)用微波爐( Haier 集團(tuán)) ; S2 － 93 自 動(dòng)雙重純水蒸餾器( 上海亞榮生化儀器廠) ; 精宏DNP-9162 型 電熱恒溫培養(yǎng)箱( 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司) ; Motic B5 顯微攝像系統(tǒng)( 麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)公司) 。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2. 1 動(dòng)物分組及模型制備

采用隨機(jī)數(shù)字表法將 48 只湘 黃雞隨機(jī)分為正常組、模型組、蠲痹歷節(jié)清方組及別嘌醇 組，每組 12 只。正常組以正常飼料( 蛋白含量 19. 8% 、鈣含 量 5% ) ，湖南省農(nóng)科院畜牧所飼料廠提供，批號(hào): 20170803) 喂養(yǎng)，其余 3 組按照相關(guān)制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模 型，方法: 以模型飼料喂養(yǎng)( 以 15kg 為 1 個(gè)基本單位，含魚粉 12. 50kg、石粉 2. 50kg、蛋白含量 50% 、鈣含量 9. 17% ) 。所有 動(dòng)物均保證每天食量，每天飲水量≤100ml，連續(xù)喂養(yǎng) 21d。

2. 2 給藥方法

自造模結(jié)束后第 1 天開始給藥，蠲痹歷節(jié) 清方給予蠲痹歷節(jié)清方湯劑( 30ml /kg) 灌胃，別嘌醇組給予 別嘌醇( 15ml /kg) 灌胃，其余2 組均以等體積 0. 9% 氯化鈉注 射液灌胃，每天 2 次，共 21d。

2. 3 觀察指標(biāo)

參考劉海姣等的測量方法，采用縛線法 測量踝關(guān)節(jié)周徑，分別于造模前及藥物干預(yù)后 1、7、14、21d5 個(gè)時(shí)相點(diǎn)測量各組雞左后足踝關(guān)節(jié)三叉處外部繞踝關(guān)節(jié) 的周徑，測量 2 次后取平均值為周長，并根據(jù)公式計(jì)算膝關(guān) 節(jié)腫脹指數(shù)。膝關(guān)節(jié)腫脹指數(shù) = ( 造模后周長 － 造模前周 長) /造模前周長。末次給藥 30min 后，將雞翅展開以暴露翼 根的靜脈，并將血管垂直穿刺采血 1ml，加 10μL EDTA 抗 凝，顯微鏡下讀取 200 個(gè)白細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中 性粒細(xì)胞數(shù)量。

2. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS 17. 0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí) 驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差( x ± s) 表示，組間比較采用單因素 方差分析，組間兩兩比較采用 LSD － t 檢驗(yàn)。P ＜ 0. 05 為差 異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

干預(yù) 1d，與正常組相比，模型組、蠲痹歷節(jié)清方組及別嘌醇組雞 踝關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 干預(yù) 7、14、21d， 與模型組相比，蠲痹歷節(jié)清方組及別嘌醇組雞踝關(guān)節(jié)腫脹 指數(shù)下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 干預(yù) 21d，蠲痹歷節(jié)清方組 與別嘌醇組雞踝關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與正常組相比，模型組雞血液中的白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞 和中性粒細(xì)胞數(shù)量均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 與模型組相 比，蠲痹歷節(jié)清方組及別嘌醇組雞的白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中 性粒細(xì)胞數(shù)量均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 討 論

急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)病急驟，常表現(xiàn)為關(guān)節(jié)及周圍組 織紅腫熱痛，且伴活動(dòng)受限，常常持續(xù) 1 周余。臨床廣泛應(yīng) 用皮質(zhì)類固醇、別嘌呤醇、非甾體抗炎藥等西藥治療急性痛 風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，但均有不同程度的毒副作用，如胃腸道反應(yīng)、組織器官損害等。近年來，IL － 1Ｒ 拮抗劑廣泛應(yīng)用于對(duì)秋 水仙堿和非甾體類抗炎性藥物的禁忌證患者，但其作用機(jī) 制尚不清楚，也未提及其毒副作用。元代朱丹溪在《格致余 論》中首次提出“痛風(fēng)”的病名，其病因各代醫(yī)家多責(zé)之濕熱 之邪，常治以清熱利濕法，如四妙散、宣痹湯、針刺與 中藥結(jié)合治療等。



 

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