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肽分離純化(精宏DHG-9140A應用)

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2020-05-19 09:56【

1 材料與方法


FZ102-SIM真空冷凍干燥設(shè)備,德國西門子公司; FSH-2A 可調(diào)高速勻漿乳化機,金壇市醫(yī)療儀器廠; THZ-82 恒溫振蕩器,常州國華電器有限公司;TDL5-A 離心機,上海安亭科學儀器廠;DHG-9140A 型 電熱恒溫鼓風干燥箱,上海精宏實驗設(shè)備有限公司。取葵花籽粕蛋白(純度 66.94 % ± 0.24 %), 經(jīng)7 %堿性蛋白酶酶解(溶液pH8、水浴溫度55 ℃、 酶解時間 2 h)、冷凍干燥,得到 ACE 抑制肽,其 ACE 抑制率為 85.49 %± 0.80 %。


2 結(jié)果與分析


在幾組上樣流速中,上樣流速 對吸附率有比較明顯的影響,選擇 2 BV/h 的上樣 流速為宜。一般來說,被吸附物質(zhì)通過樹脂越緩慢, 和樹脂接觸越充分,繼而可更好地吸附在樹脂上, 但效率會隨之下降。如樹脂已與樣品充分接觸,則 繼續(xù)降低流速,吸附率便不會提高。對于一定量的洗脫液,如加快洗脫流速,則洗 脫液與吸附在樹脂上的樣品作用的時間縮短,那么 在洗脫液對葵花籽粕 ACE 抑制肽的溶解還未達到 飽和時就已經(jīng)達到一種動態(tài)平衡,使之從吸附床上 流出。


3 結(jié)論


葵花籽粕 ACE 抑制肽分離純化最適工藝為乙 醇濃度 70 %、上樣 pH 5、上樣流速 2 BV/h、洗脫 流速 2 BV/h,得率為 93.26 %,純化后的葵花籽粕 ACE 抑制肽抑制率為 92.23 % ± 0.48 %。葵花籽粕 ACE 抑制肽對熱和金屬離子均具有良好的穩(wěn)定性。 模擬體內(nèi)消化試驗顯示,在胃蛋白酶的存在下,葵 花籽粕 ACE 抑制肽抑制率為 92.03 % ± 1.22 %,在 胃蛋白酶和胰蛋白酶同時存在時,葵花籽粕 ACE 抑制肽的抑制率為 91.49 % ± 1.74 %,表明葵花籽 粕 ACE 抑制肽的活性幾乎不受胃腸蛋白酶的影響, 可以很好作用于靶組織。






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